學(xué)習(xí)中心
目前中醫(yī)藥治療NIDDM 的實驗研究, 大多借用鏈脲佐菌素(St repozotocin , 簡稱STZ)或四氧嘧啶所致的糖尿病大鼠模型,其特點是胰島素分泌缺乏所致的高血糖和“三多一少癥”(多飲、多食、多尿、消瘦) ,與人類胰島素依賴型糖尿病( IDDM) 相似,而與NIDDM的病理特征和臨床特點相差甚遠(yuǎn)。
實驗性性NIDDM 大鼠模型具有Ⅱ型糖尿病的臨床特點和病理特征, 尤其是存在受體和受體后缺陷所致的胰島素抵抗的特征, 是實驗研究中醫(yī)藥改善胰島素抵抗作用的較好載體。
主要試劑與設(shè)備: STZ , 膠原酶(Collagenase type Ⅱ) , 海胺(Benzethonium
Hydroxide) 均為SIGMA 公司產(chǎn)品; 牛血清白蛋白(Albumin Bovine) 為Amresco 公司產(chǎn)品, D - [ U - 14C] 葡萄糖[ 1mmol/ L含U - 14 C 9. 176 GBq (即248mCi) ] 購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所。Beck2manLsl801 液體閃爍譜儀與倒置生物顯微鏡XSZ - D2。
實驗動物與飼料加工: 雄性SD大鼠(體重160g 左右) 100 只, 基礎(chǔ)鼠料總熱量6. 941 J / g (蛋白質(zhì)占23 %、碳水化合物占53 %、脂肪占5 %) , 均購自廣東省醫(yī)用動物場。肥甘飲食(高熱量飼料) 由基礎(chǔ)鼠料加蔗糖、煉豬油和雞蛋充分混勻后,用攪肉機(jī)成形、烤熟后用, 其總熱量為21. 33J / g , 其中蛋白質(zhì)占15 %、碳水化合物占51 %、脂肪占25 %。
造模方法: 基礎(chǔ)鼠料喂養(yǎng)1 周后, 將健康活潑SD 大鼠隨機(jī)分為兩組。造模組75 只, 按30mg/ kg 體重的劑量腹腔內(nèi)注射STZ (溶于0. 1 mol/ L 檸檬酸緩沖液, pH 4. 4 ) 每d1 次, 連續(xù)3 次; 正常組25 只, 腹腔內(nèi)注射等體積的檸檬酸緩沖液。造模組在末次注射2 周后, 挑選空腹血糖≥11. 1 mmol/ L 大鼠改喂肥甘飲食; 正常組仍喂基礎(chǔ)鼠料。造模期間觀測體重、攝食量、飲水量及外觀形態(tài)的變化, 造模前、肥甘飲食前及造模條件結(jié)束時, 大鼠均禁食12h 后空腹眼眶靜脈竇采血檢測血糖、血脂三項和血清胰島素(分別由我校第一附屬醫(yī)院檢驗科和校核醫(yī)學(xué)研究室檢測) 。持續(xù)喂養(yǎng)肥甘飲食10 周后, 于上午分批迅速將大鼠斷頭處死。
