細(xì)胞培養(yǎng)的一般技術(shù)
2012-05-041834
本方法是通過(guò)促細(xì)胞分裂劑與細(xì)胞表面受體相互作用，在體外觸發(fā)細(xì)胞的多克隆激活。根據(jù)所使用的促細(xì)胞分裂劑的不同，應(yīng)答細(xì)胞可以是T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞，或兩者同時(shí)，或者是單核細(xì)胞。 細(xì)胞激活可以通過(guò)細(xì)胞增殖、細(xì)胞因子分泌、表面抗原表達(dá)和/或細(xì)胞體積的增加進(jìn)行檢測(cè)。例如在使用B細(xì)胞激活劑時(shí)，可以通過(guò)多克隆免疫球蛋白的分 泌進(jìn)行檢測(cè)。
表1 常用的促細(xì)胞分裂劑和多克隆淋巴細(xì)胞激活劑
促細(xì)胞分裂劑 所 用 濃 度 應(yīng) 答 細(xì) 胞
刀豆蛋白AConA 1- 10 μg/ml T 淋巴細(xì)胞
植物凝集素PHA 1-5 μg/ml T 淋巴細(xì)胞
佛波醇酯PMA 1-10 ng/ml T 淋巴細(xì)胞
婁諾霉素+PMA 100-500 ng/ml T 淋巴細(xì)胞
脂多糖LPS 2-25 μg/ml 鼠B細(xì)胞（T不依賴(lài)型），單核細(xì)胞
美洲商陸PWN 試驗(yàn)測(cè)定 人B細(xì)胞（T依賴(lài)型）
葡萄球菌A，SAC 1/1000-1/10000 人B細(xì)胞
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